کاربرد pcr

علمی و پزشکی

روش های مختلف در تکنیک PCR

pcr چیست؟ PCR یک روش تکثیر DNA در آزمایشگاه است. PCR مخفف Polymerase Chain Reaction یا واکنش زنجیره ای پلیمراز است. در این روش، DNA هدف را با استفاده از یک آنزیم به نام  DNAپلیمراز، تکثیر میکنند. PCR چند مرحله دارد که به شرح زیر است: •  مرحله اول: دناتوراسیون. در این مرحله، DNA هدف را در دمای بالایی (حدود ۹۵ درجه سانتی گراد) قرار میدهند تا دو رشته DNA از هم جدا شوند. •  مرحله دوم: انلینگ. در این مرحله، دو عدد پرایمر (کوتاه ترین قطعات DNA) که با قسمت های ابتدایی و انتهایی DNA هدف همخوانی دارند، را به واکنش اضافه میکنند. پرایمرها در دمای پایین تر (حدود ۵۵ درجه سانتیگراد) به رشته های DNA هدف متصل میشوند و نقطه شروع برای تکثیر را تعیین میکنند. •  مرحله سوم: الانگیشن یا طویل سازی. در این مرحله، آنزیم پلیمراز DNA را به واکنش اضافه میکنند. این آنزیم در دمای متوسط (حدود ۷۲ درجه سانتیگراد) شروع به ساخت رشته جدید DNA میکند که با رشته اصلی DNA همخوانی دارد. این کار باعث تولید دو عدد DNA جدید میشود که هر کدام شامل یک رشته قالب و یک رشته جدید هستند. این سه مرحله را چندین بار (حدود ۳۰ تا ۴۰ …